home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Shareware Overload Trio 2 / Shareware Overload Trio Volume 2 (Chestnut CD-ROM).ISO / dir26 / med9406d.zip / M9460572.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-06-25  |  3KB  |  51 lines
  1.        Document 0572
  2.  DOCN  M9460572
  3.  TI    Transcriptional activation of minimal HIV-1 promoter by ORF-1 protein
  4.        expressed from the SalI-L fragment of human herpesvirus 6.
  5.  DT    9408
  6.  AU    Kashanchi F; Thompson J; Sadaie MR; Doniger J; Duvall J; Brady JN;
  7.        Rosenthal LJ; Department of Microbiology and Immunology, Georgetown
  8.        University; Medical Center, Washington, DC 20007.
  9.  SO    Virology. 1994 May 15;201(1):95-106. Unique Identifier : AIDSLINE
  10.        MED/94233781
  11.  AB    The SalI-L fragment of human herpesvirus 6 (HHV-6) strain U1102
  12.        transformed rodent cells and transactivated the HIV-1 LTR 10- to 15-fold
  13.        in both monkey fibroblasts and human T-lymphocytes. In this report, the
  14.        SalI-L transactivator of the HIV-1 LTR was localized to ORF-1 which
  15.        codes for a protein of 357 amino acids. To determine if ORF-1 required
  16.        functional Sp1 binding sites or the TATA box element of HIV-1 LTR for
  17.        transactivation, 5'-deletion mutants of the HIV-1 LTR were employed.
  18.        Plasmids pBS/SalI-L, pBS/SalI-L-SH, and pC6/ORF-1(S), a mammalian
  19.        expression vector containing ORF-1, all transactivated a deletion mutant
  20.        of HIV-1 LTR lacking functional Sp1 binding sites (CD-54). These studies
  21.        demonstrate that transactivation occurred in the absence of Sp1 binding
  22.        sites and required only a minimal HIV-1 promoter which contains the TATA
  23.        box element. The specificity of the SalI-L transactivator for HIV-1 LTR
  24.        was demonstrated by its inability to transactivate the human
  25.        papillomavirus type 16 or 18 early promoters. The ORF-1 gene was cloned
  26.        into and expressed from the pET17b bacterial expression vector. Purified
  27.        ORF-1 protein was obtained by ammonium sulfate precipitation, Mono-S
  28.        chromatography, and anti-T7. Tag immunoaffinity chromatography.
  29.        Transactivation of the HIV-1 LTR by ORF-1 protein was demonstrated by
  30.        electroporation studies in vivo and by transcription studies in vitro.
  31.        To substantiate the putative biological role of ORF-1, pBS/SalI-L,
  32.        pBS/SalI-L-SH, and pC6/ORF-1 all reactivated tat-defective HIV-1
  33.        provirus from latently infected cells expressing CD4. Thus, the data
  34.        presented suggest that HHV-6 infection could have a cofactor role in the
  35.        progression of AIDS.
  36.  DE    Amino Acid Sequence  Animal  Cell Line  Gene Deletion  Genes,
  37.        Viral/GENETICS  Herpesvirus 6, Human/*GENETICS  Human  HIV Core Protein
  38.        p24/ANALYSIS  HIV Long Terminal Repeat/*GENETICS
  39.        HIV-1/*GENETICS/PHYSIOLOGY  Molecular Sequence Data  Open Reading
  40.        Frames/GENETICS  Promoter Regions (Genetics)/GENETICS  Recombinant
  41.        Fusion Proteins/ANALYSIS/GENETICS  Sequence Alignment  Support, Non-U.S.
  42.        Gov't  Trans-Activation (Genetics)/*GENETICS
  43.        Trans-Activators/ANALYSIS/CHEMISTRY/*GENETICS  Transcription Factor,
  44.        Sp1/GENETICS  Transfection  Tumor Cells, Cultured  Viral
  45.        Proteins/ANALYSIS/CHEMISTRY/*GENETICS  Virus Activation  Virus Latency
  46.        JOURNAL ARTICLE
  47.  
  48.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  49.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  50.  
  51.